Transformação de Gluconacetobacter diazotrophicus (PAL5T) usando o plasmídeo mutagênico pTnMod-OGm contendo o gene cry1Ab em fusão com gfp

Resumo

Mauro de Medeiros Oliveira ¹, Patrícia de Medeiros Gitahy², Stefan Schwab ³, José Ivo Baldani³

¹ Bolsista de Iniciação Científica -Embrapa Agrobiologia, Graduando em Agronomia,UFRRJ. mauromedeiros@agronomo.eng.br
² Analista técnica Embrapa Agrobiologia, patricia@cnpab.embrapa.br
³ Pesquisador Embrapa Agrobiologia, jibaldani@cnpab.embrapa.br;
³ Pesquisador 3Embrapa Agrobiologia sscwab@cnpab.embrapa.br.



O desenvolvimento de um bioinseticida capaz de controlar pragas de grande expressividade nos canaviais além de contribuir para redução no uso de fertilizantes nitrogenados abre novas perspectivas para agricultura. O gene cry1Ab,  de Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki estirpe S76, codifica uma proteína entomopatogênica (delta-endotoxina),  que atua no controle de insetos considerados pragas da ordem Lepidóptera.  Estudos conduzidos no laboratório da Embrapa Agrobiologia caracterizaram o gene cry1Ab visando a sua expressão na bactéria diazotrófica Gluconacetobacter diazotrophicus que coloniza endofiticamente plantas de cana-de-açúcar. Uma das dificuldades para expressar o gene na bactéria é que, apesar desta ter tido sua sequência genômica determinada recentemente, pouco se conhece sobre a expressão proteica nesta bactéria, como, por exemplo, sua preferência de códons, a atividade de promotores, vetores que são estavelmente replicados, etc. O vetor pTnMod-OGm tem sido utilizado para a transposição de genes heterólogos para o cromossoma de bactérias Gram-negativas, incluindo a própria G. diazotrophicus. Neste sentido o presente trabalho avaliou a clonagem dos genes  cry1Ab em fusão com o gene repórter gfp no vetor  pTnMod-OGm visando a sua transferência e expressão na bactéria G. diazotrophicus.

Palavras-Chave: Diatraea saccharalis; controle biológico; bactérias endofíticas diazotróficas


Linha de Pesquisa:.Biologia Molecular, Biotecnologia e Biosegurança

Categoria: Iniciação cientifica