Envolvimento da ORF GDI_0415 na produção de bacteriocina em Gluconacetobcter diazotrophicus

Resumo

A ORF GDI_0415 associado à síntese de bacteriocina foi identificada no genoma da estirpe PAL5T da bactéria endofítica diazotrófica Gluconacetobacter diazotrophicus. Entretanto não há na literatura informações disponíveis sobre o papel desempenhado por este gene no antagonismo contra bactérias fitopatogênicas. O objetivo deste estudo foi determinar a função da ORF GDI_0415 na produção de uma possível bacteriocina e avaliar seu efeito antagonista contra a estirpe ICMP 196 do fitopatógeno Xanthomonas albilineans, agente etiológico da escaldadura das folhas em cana-de-açúcar. A sequência nucleotídica correspondente a ORF GDI_0415 foi amplificada por PCR com de iniciadores específicos empregando DNA total da estirpe PAL5T como molde, clonada em vetor suicida (pGEM-T Easy) e, posteriormente, interrompida pela inserção do transposon EZ::Tn5TM. A construção contendo a ORF interrompida foi empregada na transformação da estirpe selvagem PAL5T por meio de eletroporação. Mutantes gerados por eventos de recombinação homóloga dupla foram obtidos e, fisiologicamente avaliados quanto à produção de substâncias antagônicas contra X. albilineans utilizando a metodologia de difusão em dupla camada. Foi observado que a estirpe selvagem gerou um halo de inibição representativo contra o fitopatógeno após a exposição à luz ultravioleta, enquanto que, o mutante não apresentou atividade antagônica contra X. albilineans, sugerindo que a ORF GDI_0415 está envolvida na produção de uma substância antagônica.