Mutante de uma provável endoglicanase de Gluconacetobacter diazotrophicus PAL5 é defectivo na adesão em raízes de arroz

Resumo

Estudos anteriores revelaram que o gene gumD presente no cluster gum de Gluconacetobacter diazotrophicus PAL5^T, responsável pela síntese de exopolissacarídeos nesta bactéria, está envolvido na colonização de raízes de arroz. Atipicamente, um gene eglA (ORF GDI_2537) com similaridade de sequência a genes de endoglicanases foi identificado neste cluster. O objetivo deste trabalho foi investigar o envolvimento de eglA na adesão sobre raízes de arroz empregando um mutante eglA^- de G. diazotrophicus. Este mutante foi gerado a partir da clonagem do gene eglA em vetor suicida, posterior interrupção deste gene pela inserção do transposon EZ::Tn5<KAN-2>^TM e, após a eletroporação de G. diazotrophicus com esta construção, um mutante gerado a partir de recombinação homóloga dupla foi obtido. A colonização endofítica de plântulas de arroz (var. IAC-4440), crescidas em tubos de vidro, com 17 dias de idade foi avaliada após dez dias de inoculação com a estirpe selvagem PAL5^T e com a estirpe mutante na concentração de 10⁵ células.ml^-1. Estes ensaios revelaram que a colonização endofítica e a aderência radicular foram abolidas no mutante eglA^-. Tais resultados fornecem a evidência de que o gene eglA presente em G. diazotrophicus é um importante fator para a adesão e colonização endofítica da referida bactéria em  raízes de arroz.