ISOLAMENTO DE BACILLUS THURINGIENSIS ENDOFÍTICO PRESENTES EM CANA-DE-AÇÚCAR COM POTENCIAL ENTOMOPATOGÊNICO A TELCHIN LICUS LICUS

Resumo

A praga Telchin licus licus (broca gigante) é uma das principais responsáveis pelas perdas de produção na cultura da cana-de-açúcar principalmente no Nordeste brasileiro, sendo o controle químico bastante difícil. Uma alternativa ao controle químico e que tem se mostrado bastante eficiente no controle de diversos insetos é o uso de Bacillus thuringiensis. Este trabalho tem como objetivo isolar estirpes endofíticas de B. thuringiensis de áreas produtoras de cana-de-açúcar e avaliar o potencial de controle contra T. licus licus. Para tanto foram coletadas larvas de T. licus licus, colmos e raízes de cana-de-açúcar de três usinas produtoras do estado de Alagoas. Foi feita a extração de bactérias do líquido do apoplasto, do cilindro central dos entrenós e raízes desinfestadas (solução de cloramina-T 1%). Também foram isoladas bactérias do tubo digestivo de larvas de T. licus licus após a morte em clorofórmio e desinfestação em solução de hipoclorito de sódio a 2%. O líquido do apoplasto, o macerado do cilindro central, das raízes e do tubo digestivo das larvas passaram por processo de pasteurização, que consiste na submissão a temperatura de 80^oC durante 12 minutos seguido de incubação no gelo por cinco minutos. As amostras pasteurizadas foram diluídas e semeados em placas de Petri contendo meio BHI. Foram isoladas um total de 796 bactérias, sendo 220 bactérias isoladas do líquido do apoplasto, 361 do cilindro central, 158 das raízes e 57 do tubo digestivo de T. licus licus. Estudos para identificação das espécies de Bacillus utilizando a técnica de REP-PCR, caracterização fenotípica (GRAM, capacidade de produção de esporos) e identificação de genes cry estão em andamento. Ensaios in vitro deverão identificar estirpes endofíticos pertencentes a espécie B. thuringiensis com capacidade entomopatogênica contra T. licus licus e selecionar estirpes com potencial biotecnológico para uso no campo.