Envolvimento das ORFs GDI_1385 e GDI_1386 no transporte de ferro em Gluconacetobacter diazotrophicus

Resumo

Gluconacetobacter diazotrophicus é uma bactéria diazotrófica, que coloniza endofiticamente espécies vegetais. Além da própria fixação biológica de nitrogênio, esta bactéria contribui para promoção do crescimento vegetal, com a produção de fitohormônios, sideróforos, bacteriocinas e, com a solubilização de fosfato. Apesar de G. diazotrophicus ter sido descrita a cerca de 20 anos, diversas questões permanecem sem respostas, mesmo para atividades essenciais a sua sobrevivência, como, por exemplo: a regulação e o transporte de ferro. Em bactérias gram-negativas, o ferro é translocado para o citoplasma por um processo que requer energia, envolvendo um receptor dependente de TonB, localizado na membrana externa, e do complexo citoplasmático TonBExbBD. Com o sequenciamento do genoma da estirpe PAL5T, foi observada a existência de duas ORFs: GDI_1385 e GDI_1386, que apresentam similaridade com o genes exbD, tendo sido anotadas como: exbD1 e exbD2, respectivamente. As proteínas ExbB e ExbD são importantes na manutenção estrutural de TonB, que é o responsável pela transdução de energia para o receptor dependente de TonB, envolvido com transporte ativo de ferro e de moléculas. O objetivo deste projeto visa a caracterização funcional de ExbD1 e ExbD2 na estabilização do complexo TonBExbBD. Para tal, serão gerados mutantes interrompidos nestas ORFs, sendo avaliada sua viabilidade e crescimento na presença e ausência de ferro, bem como, motilidade, capacidade de formação de biofilme e adesão e colonização de arroz e/ou cana-de-açúcar.