Identificação de bactérias Xenorhabdus e Photorhabdus, baseada na sequência do gene RNAr 16S

Resumo

Nematoides entomopatogenicos (NEPs), Steinernema e Heterorhabditis, nativos do Brasil, da coleção de micro-organismos entomopatogenicos, do Instituto Biológico - SP foram reproduzidos em larvas de ultimo instar de Galleria mellonella. As bactérias simbiontes, Xenorhabdus e Photorhabdus, da família Enterobacteriaceae, foram isoladas a partir da hemolinfa das larvas de G. mellonela infetadas e também por meio do macerado direto de nematoides imaturos (juvenil infectante). As bactérias foram caracterizadas como Xenorhabdus spp. e Photorhabdus spp. na fase primaria, segundo seu crescimento e coloração em agar NBTA, bioluminescência , microscopia e perfil metabólicos no testes API 20E e API 20E. Foi feita a identificação molecular mediante o seqüenciamento do gene RNAr 16S e a comparação da seqüências obtidas com as seqüências das bactérias descritas depositadas no banco de dados internacional. As espécies bacterianas isoladas de cada nematoide foram identificadas como; P. luminescens subsp akurtsii (Heterorhabditis indica CBn05), P. luminescens (H. amazonensis AM71), P. luminescens subsp luminescens (H. amazonensis CB10), X. nematophila (Steinernema carpocapse CBn02), X. doucetiae (S. brazilense CBn06), X. szentirmaii (S. rarum PAM10), X. koppenhoeferi (S.sp CER105), X. romanii (S. puertoricense CER129), X. sp (S. costaricense CER17) e X. sp (S. diaprepesi AM47), as duas ultimas bactérias obtiveram uma porcentagem menor do 96% de similitude com as outras bactérias do GenBank, o qual torna necessária a amplificação de outros genes para confirmar se pode se tratar de novas espécies.